徠卡熒光顯微鏡的光源裝置及濾色系統(tǒng)
光源裝置是徠卡熒光顯微鏡的主要部分,它的作用是提供足夠強(qiáng)度的激發(fā)光,現(xiàn)代熒光顯微鏡基本上采用超高壓汞燈光源裝置,它由電源箱和燈室兩部分組成。超高壓汞燈的發(fā)光,是電極間放電使水銀分子在不斷解離和還原過(guò)程中發(fā)出量子的結(jié)果,它具有固定的光譜曲線(xiàn),在紫外和紫藍(lán)部分都有很強(qiáng)的發(fā)射,足以激發(fā)各類(lèi)熒光物質(zhì),這是它被普通采用作為徠卡熒光顯微鏡光源的主要原因。一般都采用200W的超高壓汞燈作光涌,其使用平均壽命約200小時(shí)左右。
由于超高壓汞燈的電壓很高(約15000V),另外紫外線(xiàn)也很強(qiáng),燈泡裝置在燈室中的后方,以防傷害眼睛。
徠卡濾色系統(tǒng)
濾色系統(tǒng)是徠卡熒光顯微鏡的重要部分,它由激發(fā)濾片(*濾片)和抑制濾片(第二濾片)所組成。前者提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光,后者提供相應(yīng)波長(zhǎng)范圍的熒光。其濾片通常用有色玻璃組成。
徠卡激發(fā)濾片根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn),可分為紫外光激發(fā)濾片,紫藍(lán)光激發(fā)濾片和紫外藍(lán)光激發(fā)濾片。
近年來(lái),隨著金屬鍍膜技術(shù)的發(fā)展,已開(kāi)始采用選擇性更強(qiáng)的金屬膜干涉濾片,由于它調(diào)對(duì)性強(qiáng),波長(zhǎng)適當(dāng),因而激發(fā)效果比有色玻璃片更好。
所需激發(fā)濾片的厚度,主要根據(jù)所用徠卡顯微術(shù)激發(fā)方式而定,徠卡暗場(chǎng)熒光顯微術(shù)要求激發(fā)濾片薄一些,明場(chǎng)時(shí)則要求厚一些,因?yàn)槭褂冒祱?chǎng)時(shí),激發(fā)光不直接進(jìn)入物鏡,另外還得考慮標(biāo)本情況和目的性,基本原則是以獲得zui明亮的熒光和的背景襯托為準(zhǔn)。
抑制濾片的選擇,主要根據(jù)激發(fā)濾片而定。其原則是以*吸收激發(fā)光為準(zhǔn),即與激發(fā)濾片重疊應(yīng)該不透過(guò)任何可見(jiàn)光(*互補(bǔ))以保護(hù)眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發(fā)濾片相對(duì)應(yīng),抑制濾片也可分為:紫外光抑制濾片、紫藍(lán)光抑制濾片和紫外藍(lán)光抑制濾片。